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pcr哪个好

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文献提到U6作为内参基因,但是发现U6的种类也有很多,应该怎么选择?U6保守性高吗?不同植物的引物可以通用吗?比如苔藓植物的和被子植物的U6引物可以通用吗?
如果用茎环法反转录miRNA,miRNA特意反转录引物和内参特异反转录引物加在同一个反应管内吗,可行性多大?有没有相关文献?假如可以加在同一管反转录,那么接下来qRT-PCR的miRNA和U6的正反引物加在同一管还是分开进行? ...

SYBR和探针法定定量PCR哪个好,引物设计是否一样: 肯定是tagman探针做出来的结果好,但是贵啊。
引物设计略有不一样,但都可用Primer5设计。

实时荧光定量PCR仪,罗氏和ABI哪个更好些?: 肯定是ABI的更好,因为ABI是龙头老大,大多数的国产试剂盒都是在它的平台上来做的,只要不是用原厂试剂盒,肯定国产的试剂盒更便宜,这方面ABI很占优势,ABI仪器相对较贵,但确实是质量最好的

国产实时荧光定量PCR仪哪家好:

性能    

样本容量  

适用耗材   

反应体系   

适用染料/探针    
F2:

线性范围   

Ct值重复性误差    

核酸精度相关系数    

光学系统    

激发光波长   

检测波长    

激发光源    

荧光检测器 

温控系统    

控温范围    

热盖温度    

最大升/降温速度    

温度均匀性    

温度精确度    

温度显示精度   

这些参数是楼主要看的


PCR技术在植物病害诊断中的作用及其优缺点?: 聚合酶链式反应(PCR)及建立在此之上的分子生物学技术用于体外扩增DNA,在生物学、医学及植物病理学等领域已经得到了广泛应用。PCR技术应用于植物病害的诊断检测,植物病原真菌、细菌、线虫的分类鉴定,克隆基因、鉴定抗病基因以及病原物的定量等方面,具有灵敏、特异、快速、简便等较好的效果,但PCR技术在植物病理学领域的应用仍存在一定的局限性。

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翊圣生物的荧光定量pcr试剂盒好用吗,就是反转录加PCR二合一那种: 汗 楼太纠结吧 说用特异性引物反转录cDNA 能用同引物做普通PCR 用OligodT或者随机引物反转录 引物都做 度没关系 通普通PCR扩增都拿cDNA

荧光定量pcr溶解曲线好几个峰,但是电泳只有一条目的条带,怎么回事: 模板量比较低,有条带但是太浅你看不出来

我们实验室想买 多重PCR扩增试剂盒 哪种品牌的比较好啊?博凌科为的怎么样啊: 博凌科为多重PCR扩增试剂盒 超高活性高特异的耐热DNA聚合酶
该试剂盒是专门为多重PCR研发的专 项产品,包含多重PCR实验所需的全套试剂。其中Multi HotStart DNA Polymerase是目前发现的所有热启动酶中性能最好的耐热聚 合酶。该酶利用化学修饰实现热启动,必须95℃加热15min才能充分释放酶活,保证了极高的特异性。可以满足多组PCR引物在同 一体系中进行良好的扩增,灵敏的进行多重PCR反应。该酶在低温或常温无聚合酶活性,可在常温进行PCR体系配制。高纯度 dNTPs可以进一步保证扩增的特异性。如果模板特殊,可以通过调节Mg2+的浓度改善扩增效果。

产品特点
■ 高特异性:化学修饰的热启动酶,激活时 间长达15min,保证高特异扩增。
■ 高灵敏性:可以实现低拷贝扩增和多重PCR的高效扩增。
■ 操作简便:该酶在低温和常温下无活性,可在室温进行试剂的配制。

适用范围
■ 多重PCR实验
■ 高特异性检测实验
■ 低拷贝扩增实验
■ 复杂结构模板的PCR扩增(如结构复杂的genomic DNA, cDNA等)

保存条件: -20℃

qRT-PCR检测植物miRNA的表达量,内参基因选择什么最好?可以给出特意反转录引物和qRT-PCR的引物吗?: 我知道和使用过的U6内参基因只有两个: RNU6-1和RNU6-2.前一个就是常见的u6,后一个有时被称为u6b. 在我的大鼠RNA样本当中,u6表达量有些太高,u6b的Cq值与我的目标miRNA比较接近,稳定性也很好。但是这些对植物样本中的内参基因选择没有什么指导意义。

为了确定u6在植物中的保守性,比较快捷的办法是找到谈论这个话题的文献综述。如果没有人写过这样的综述的话,就只能靠自己去数据库找到所有序列自己对比了。

关于内参基因的选择,必须实验确定特定样本中的表达水平稳定,其他文献中报导的内参基因不一定适合你的样本。做新的课题时,选择内参基因一般是选取3-5个常用的,PCR测试后选取。

这里有applied biosystem一篇非常好的文章讨论内参基因,里面有很多建议和备选,但都是人和小鼠中测试的。我贴链接不方便,麻烦你自己把点和斜换成标点以后使用:
www3点appliedbiosystems点com斜cms斜groups斜mcb_marketing斜documents斜generaldocuments斜cms_044972点pdf

以上公司的miR PCR是茎环法,也是我使用过的,两个引物不在同一个管内,两个步骤也是完全分开先后进行的。暂时没有看到他们有内参和目标基因在同一反应管进行的miR PCR产品, 因为他们的PCR探针都用的同一种荧光。如果楼主感兴趣RT-PCR一步反应的,并且内参能够与目标miR在同一反应体系进行的产品,还要去咨询各大厂商。

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